Açıklama
Spesifik: DsDNA’ya zarar vermeden ve çift iplikli DNA’da kısa 3′ uçlarına zarar vermeden 3 ‘ila 5’ yönünde ssDNA’yı sindirir.
Esnek: Çok çeşitli tampon koşullarında aktiftir ve çoğu reaksiyon karışımına doğrudan eklenebilir.
Isı İnaktive: En fazla 15 dakika 80 ° C’de inkübe ederek enzim aktivitesini yok edin.
Exonuclease ssDNA’yı 3′-5’lerde sindirir, ancak dsDNA’yı sindirmez. Etkinlik için magnezyum ve serbest bir 3′-hidroksil terminusu gerektirmesine rağmen, çok çeşitli tampon koşullarında aktiftir ve doğrudan çoğu reaksiyon karışımına eklenebilir. Eksonükleaz, 80 ° C’de 15 dakika inkübasyon ile ısıyla inaktive edilebilir.
Uygulamalar
Reaksiyon karışımlarından oligos dahil, kalıntı ssDNA’nın uzaklaştırılması.
Nükleik asit karışımlarından ssDNA’nın uzaklaştırılması.
Birim Tanım: Bir birim Exonuclease I, standart test koşulları altında 30 dakika içinde 30 dakika içinde ısı ile denatüre edilmiş buzağı timus DNA’sından 10 nmol asit-çözünebilir nükleotitlerin salınmasını katalize eder.
Depolama Tamponu: 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT ve % 50 gliserol içeren % 0.1 Triton® X-100.
Kalite Kontrol: Exonuclease I ssDNA’nın bozunmasında test edilir ve saptanabilir RNaz, endonükleaz ve çift iplikli ekzonükleaz aktivitelerinden arındırılmıştır.