Açıklama
Cas9 Nuclease NLS, S pyogenes, çift iplikli DNA’nın bölge-spesifik kırılmasını katalizleyen bir RNA rehberli endonükleazdır. Kırılma bölgesi NGG protospacer komşu motifinin 3 baz yakını içerisindedir. tekli rehber RNA (sgRNA)’nın tasarımı PAM bölgesinin yakınında bulunan hedef bölgesine bağlıdır. Hedef DNA dizi gerekli görülen bütün koşulları sağlamasına rağmen, sgRNA özgünlüğü ve aktivitesi tahmin edilemezdir. Bu yüzden genelde ilgilenilen gen bölgesi için birden fazla farklı sgRNA nın tasarlanması önerilir. GenCrispr sgRNA Screening Kit, hücre transdüksiyonundan önce sgRNA etkinliğini ölçmek için kullanılacak basit, hızlı ve güvenilir bir metod sunarak, yüksek verimli CRISPR sgRNA’larını tanımlamanıza olanak sağlar.
|
Bileşenler
|
Miktarlar | |
| 30 tepkime için | 100 tepkime için | |
|
GenCrispr Cas9 Nuclease
|
15 μL | 50 μL |
|
10X Reaction Buffer
|
100 μL | 300 μL |
|
Positive Control sgRNA
|
3 μg | 10 μg |
|
Positive Control Substrate
|
60 μL | 200 μL |
|
RNase-free water
|
1 mL | 1 mL |
