Açıklama
High-Efficiency gRNA-Cas9-GFP Plasmid (linear) Assembly Kit gRNA fragmentlerinin Cas9 vektörlerine kolayca ve etkili bir şekilde klonlanması için kullanılan bir kittir. Bu vektör gRNA insert bölgesine raportör gen entegre edilmesiyle oluşturulmuştur. Bu raportör genlerin seleksiyonundan sonra tarama yapılmasına gerek kalmadan nerdeyse bütün klonların pozitif klon olduğu kabul edilir. Yüksek verimli gRNA-Cas9-GFP plasmid, hem halkasal, hem de doğrusal formda verilmiştir. Doğrusal yapı, digestion ve saflaştırma işlemlerini atlamaya izin vererek zaman kazandırır. GFP fluoresan proteini kendini kesen bir peptid olan 2A ile bağlanır, ardından Cas9’dan bağımsız bir şekilde anlatım yaparak, Cas9 aktivitesini maksimum seviyede tutmaya yardımcı olur.
