CircLigase ™ II ssDNA Ligaz *, bir 5′-fosfat ve bir 3′-hidroksil grubuna sahip olan ssDNA şablonlarının intramoleküler ligasyonunu (yani, daireselleştirme) katalize eden bir termostabil enzimdir. Tamamlayıcı bir DNA dizisi üzerinde birbirine bitişik olarak bağlanan DNA uçlarını bağlayan T4 DNA Ligaz ve Ampligase® DNA Ligazının aksine, tamamlayıcı bir dizinin yokluğunda CircLigase II ssDNA Ligaz ssDNA’nın uçlarını bağlar. Bu nedenle enzim, doğrusal ssDNA’dan dairesel ssDNA molekülleri yapmak için yararlıdır. Dairesel ssDNA molekülleri yuvarlama daire çoğaltma veya yuvarlama daire transkripsiyonu için alt tabaka olarak kullanılabilir.

CDNA dahil olmak üzere> 15 bazın lineer ssDNA’sı CircLigase II enzimi tarafından sirküle edilir. Standart reaksiyon koşulları altında, neredeyse hiç lineer konkatamer veya dairesel konkatamer üretilmez. SsDNA üzerindeki aktivitesine ek olarak, CircLigase II enzimi, bir 3′-hidroksil ribonükleotit ve bir 5′-fosforillenmiş ribonükleotit veya deoksiribonükleotide sahip tek iplikli bir nükleik asidin bağlanması aktivitesine de sahiptir.

CircLigase II, daha iyi aktivite ve geliştirilmiş ligasyon verimliliği için yeni bir Reaksiyon Tamponuna sahiptir.

Birim Tanım: Bir birim CircLigase II enzimi 1 pmol lineer 5′-fosforile CircLigase II Standard 55-mer Oligo’yu standart test koşulları altında 60 ° C’de 1 saat içinde eksonükleaz I-dirençli dairesel formuna dönüştürür.

Depolama Tamponu: 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT ve % 50 gliserol içeren % 0.1 Triton® X-100.

10X Tepkime Tamponu: 0.33 M Tris-Asetat (pH 7.5), 0.66 M potasyum asetat ve 5 mm DTT.

Kalite Kontrol: CircLigase II ssDNA Ligaz, saptanabilir fosfataz, DNA ekso ve endonükleaz ve RNaz aktivitelerinden arındırılmıştır.