Açıklama
GenCrispr NLS-Cas9-D10A Nickase, Cas9 Nuclease’ın bir mutatif formudur. Cas9 Nuclease çift iplikli DNA yapısında kırıkların oluşumunu katalizleyen RNA-rehberli bir endonükleazdır. Bu tür hedefli nükleaz yüksek isabetle genom düzenleme yapabilmek için çok güçlü bir araçtır. Cas9 nükleaz çift iplikli DNA’da kırık oluşturarak iki aktif domenine göre iki kırık bölgesi oluşturur. NLS-Cas9-D10A Nickase, Cas9 Nükleazın bir aktif domeni deaktive edilmiş mutatif bir formudur, gRNA ya komplementer olan DNA’da sadece bir iplikte kırılma meydana getirebilir. İki farklı gRNA kombine edilerek kullanıldığında, NLS-Cas9-D10A Nickase farklı iki kırık bölgesi oluşturarak çift iplik kırığı oluşturur. Yaban tipi Cas9 nükleaza kıyasla iki-gRNA rehberli kesim, yan hedeflerin kesilmesini büyük ölçüde azaltır.
Ürün kaynağı: GenCrispr NLS-Cas9-D10A Nickase, Streptococcus pyogenes mutasyonlu Cas9 geninin anlatımını yapan plasmidi taşıyan E.coli suşunun anlatımını yaptığı aşırıf saflaştırılmış mutant proteinlerdir.
Ana özellikleri:
DNA-bağımsız: sisteme dış kaynaklı DNA eklenmesine ihtiyaç yoktur.
Yüksek kesim verimi: NLS Cas9 proteinin nucleus’a girişini sağlar.
Düşük yan hedefler: Çift gRNA-hedefli kesim ve Cas9 nuclease’ın geçici anlatımı
Zamandan tasarruf: Transkripsiyon ve translasyona ihtiyaç yok.
Bu Cas9 enzimi ile: in vitro DNA kırıkları kullanılarak yüksek verimli ve spesifik gRNA hedeflemelerini izleyebilirsiniz. Elektroporasyon ya da injeksiyon yardımıyla spesifik gRNA kullanarak in vivo gen düzenlemesi yapabilirsiniz.